白细胞介素18抗体对重症肌无力小鼠模型的治疗作用

摘要：目的 探讨白细胞介素18抗体对实验性自身免疫性重症肌无力模型小鼠的治疗作用.方法 采用经典主动免疫方法建立实验性自身免疫性重症肌无力模型,对照组在相同时间给予同等量的生理盐水.免疫第70天,采用双盲法利用标准的Lennon等的分级法对实验小鼠进行临床评分,取评分在1～2之间的小鼠模型36只利用随机数字表法分为3组:单纯造模组(给予生理盐水腹腔注射),IL-18抗体治疗组和醋酸泼尼松治疗组(治疗对照).在第70～ 90天坚持测定模型小鼠的体重,进行临床评分记录.并在第90天采血,利用ELISA方法进行血清抗乙酰胆碱受体(AchR)抗体IgG和各亚型分析,以及IL-4等细胞因子含量检测.结果 实验后第60天的体重,对照组为(20.28±0.93)g,造模组为(17.58±1.11)g,IL-18抗体治疗组为(17.28±0.98)g,醋酸泼尼松治疗组为(17.53 ±0.92)g,均比对照组明显减轻;实验后第90天的体重,对照组为(21.3±1.36)g,造模组为(16.67 ±0.97)g,IL-18抗体治疗组为(19.25±0.82)g,醋酸泼尼松治疗组为(19.33 ±0.72)g,造模组仍然比对照组低(t=4.331,P=0.000 8),但给予IL-18抗体(t=2.943,P=0.007 5)或醋酸泼尼松(t=2.901,P=0.008 3)治疗后体重有所恢复.在临床评分方面,实验终止当天对照组评分为0分,造模组为(2.66 ±0.47)分,造模组比对照组明显升高(t=5.389,P=0.0005),而IL-18抗体治疗组评分为(0.54±0.51)分,醋酸泼尼松治疗组为(0.66±0.42)分.对照组的血清抗AchR IgG及IgG1、IgG2b的吸光度值分别为0.72±0.12、0.60±0.10、0.49±0.09,造模组分别为3.85 ±0.29、1.81±0.12、0.99±0.07,造模组均比对照组高(总IgG,=4.212,P=0.000 8;IgG1,t=4.105,P=0.000 9;IgG2b,t=3.798,P=0.0011);IL-18抗体治疗组分别为0.90±0.14、0.65±0.13、0.57±0.06,醋酸泼尼松治疗组分别为0.86±0.16、0.69±0.12、0.58±0.11,均回落至正常水平,且与造模组相比差异均有统计学意义(IL-18抗体组:总IgG,=4.322,P=0.0007;IgG1,t=4.423,P=0.000 6;IgG2b,t=3.879,P=0.001 2.醋酸泼尼松组:总IgG,t=4.321,P=0.000 7;IgG1,t=4.012,P=0.000 9;IgG2b,t=3.654,P=0.001 4).对照组的IL-4、IL-10、IL-17和IFN-γ的吸光度值分别为49.81±4.61、84.42±7.34、21.71 ±4.41、116.32±10.11,造模组分别为12.66±3.10、22.23±6.03、112.74±7.70、307.82±18.10,IL-18抗体治疗组分别为46.41±5.59、75.07±18.97、21.38±2.45、124.84±17.65,醋酸泼尼松治疗组分别为44.60±5.46、77.41±18.58、19.63±4.48、118.96±14.85,说明造模组IL-4(=4.331,P=0.000 7)、IL-10(t=4.108,P=0.000 9)的含量明显降低,而IL-17(t=4.678,P=0.0005)和IFN-γ(=4.022,P =0.001 2)的水平明显升高,在给予IL-18或醋酸泼尼松进行治疗后这些指标均恢复到正常水平.结论 IL-18抗体能有效地降低实验性自身免疫性重症肌无力模型小鼠的临床症状评分,其机制可能与减轻模型小鼠的免疫反应有关.